品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN608006446 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
細胞名稱 | 豬小腸上皮細胞IPEC-J2 | ||
貨物編碼 | BFN608006446 | ||
產品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 1類 |
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone) | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 豬小腸上皮細胞IPEC-J2提取于新生未經過哺乳的豬小腸組織。不規(guī)則形態(tài),貼壁培養(yǎng)。 | ||
注釋 | Doubling time: ~40-60 hours (DSMZ). Omics: Deep proteome analysis. Omics: Transcriptome analysis. | ||
STR信息 | / | ||
參考文獻 | DOI=10.1155/2013/980651 Stoy A.C.F., Heegaard P.M.H., Sangild P.T., Ostergaard M.V., Skovgaard K. Gene expression analysis of the IPEC-J2 cell line: a simple model for the inflammation-sensitive preterm intestine. ISRN Genomics 2013:980651-980651(2013)
PubMed=24260272; DOI=10.1371/journal.pone.0079643 Zakrzewski S.S., Richter J.F., Krug S.M., Jebautzke B., Lee I.-F.M., Rieger J., Sachtleben M., Bondzio A., Schulzke J.-D., Fromm M., Gunzel D. Improved cell line IPEC-J2, characterized as a model for porcine jejunal epithelium. PLoS ONE 8:E79643-E79643(2013)
PubMed=26147118; DOI=10.1371/journal.pone.0132323 Nossol C., Barta-Boszormenyi A., Kahlert S., Zuschratter W., Faber-Zuschratter H., Reinhardt N., Ponsuksili S., Wimmers K., Diesing A.-K., Rothkotter H.-J. Comparing two intestinal porcine epithelial cell lines (IPECs): morphological differentiation, function and metabolism. PLoS ONE 10:E0132323-E0132323(2015)
PubMed=26975772; DOI=10.4014/jmb.1512.12075 Kim S.H., Pajarillo E.A.B., Balolong M.P., Lee J.Y., Kang D.-K. Constructing proteome reference map of the porcine jejunal cell line (IPEC-J2) by label-free mass spectrometry. J. Microbiol. Biotechnol. 26:1124-1131(2016) |
驗收細胞注意事項
1、收到豬小腸上皮細胞IPEC-J2細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。
2、收到豬小腸上皮細胞IPEC-J2細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到豬小腸上皮細胞IPEC-J2細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到豬小腸上皮細胞IPEC-J2細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000 轉/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,小鼠T細胞雜交瘤細胞B3Z細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。