歡迎您,來到青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司!
簡要描述:青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺,在標(biāo)準(zhǔn)化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對用戶負責(zé)的態(tài)度,以對科研的高度嚴謹,以嚴格的質(zhì)量控制,為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)!
更新時間:2021-05-27
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
瀏覽次數(shù):455
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60804791 |
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規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
細胞名稱 | 小鼠肺上皮細胞MLE-12 | ||
貨物編碼 | BFN60804791 | ||
產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 1類 |
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%三抗 | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 小鼠肺上皮細胞MLE-12取自FVB/N雌性小鼠,5月齡。該細胞經(jīng)過SV40永生花處理。該細胞引種自ATCC CRL-2110 | ||
注釋 | Doubling time: 7-9 hours, at 12th passage (PubMed=8248207). Transformant: NCBI_TaxID; 1891767; Simian virus 40 (SV40). Derived from sampling site: Lung. | ||
STR信息 |
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參考文獻 | PubMed=8248207; DOI=10.1073/pnas.90.23.11029 Wikenheiser K.A., Vorbroker D.K., Rice W.R., Clark J.C., Bachurski C.J., Oie H.K., Whitsett J.A. Production of immortalized distal respiratory epithelial cell lines from surfactant protein C/simian virus 40 large tumor antigen transgenic mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:11029-11033(1993) |
驗收細胞注意事項
1、收到小鼠肺上皮細胞MLE -12,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。
2、收到小鼠肺上皮細胞MLE-12,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到小鼠肺上皮細胞MLE-12后,請鏡下觀察細胞,用恰當(dāng)方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到小鼠肺上皮細胞MLE-12時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,小鼠肺上皮細胞MLE-12恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準(zhǔn))PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準(zhǔn),一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準(zhǔn)。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。