Carrier DNA

● 產(chǎn)品規(guī)格

● 產(chǎn)品說明

Carrier DNA (鮭魚精DNA) 為短的線形單鏈DNA，可包裹質(zhì)粒DNA，在酵母細(xì)胞攝取外源質(zhì)粒DNA過程中發(fā)揮作用，促進(jìn)質(zhì)粒進(jìn)入酵母細(xì)胞，另外還可保護(hù)質(zhì)粒免于被DNA酶降解。在每次使用前務(wù)必進(jìn)行兩次熱變性，保證Carrier DNA在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)體系中以單鏈形式存在。

Carrier DNA是青旗生物生產(chǎn)的酵母感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化所必需的配套試劑，每個(gè)轉(zhuǎn)化反應(yīng)需要10µl Carrier DNA。

● 操作方法

1. Carrier DNA 在每次使用前要通過加熱處理使其變性為單鏈狀態(tài)，步驟如下：Carrier DNA 放95℃水浴或金屬浴3 min，快速插入冰中，靜置3 min，再次放95℃水浴或金屬浴3 min，快速插入冰中，靜置3 min以上。

2. 取100 µl冰上融化的酵母感受態(tài)細(xì)胞，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg，Carrier DNA 10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打幾次混勻，30℃水浴30 min (15 min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

3. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

4. 5000 rpm離心 40 s棄上清，ddH₂O 400 µl 重懸，離心 30s棄上清。

5. ddH₂O 50 µl重懸，涂板，29℃培養(yǎng)48-96 h。

● 注意事項(xiàng)

1. 在每次使用前務(wù)必進(jìn)行兩次熱變性，保證Carrier DNA在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)體系中以單鏈形式存在。

2. Carrier DNA 可在4℃短時(shí)間保存，如需長時(shí)間保存請放-20℃。